苏云金芽孢杆菌Cry1类毒素免疫广谱检测技术研究
作者：焦凌霞，刘媛，刘贝贝 著
出版时间：2018年版
内容简介
采用正负筛选方法，成功获得6株具有Cry1Ab毒素蛋白结合活性的阳性噬菌体单域抗体菌株，利用基因工程抗体易于定向修饰及Cry毒素具有相似结构的特点，以Cry1Ab毒素单域抗体基因为材料，通过同源建模及分子对接技术分析了Cry1Ab抗体与5种Cry1类毒素的关键氨基酸结合位点，以关键结合位点及其邻近位点为目标，利用SPDBV软件进行虚拟协同突变，预测亲和力及广谱性都有所提高的突变抗体，并通过定点饱和突变技术定向改造母本抗体构建突变抗体库；克隆表达了Cry1类毒素共性结构域，并利用共性结构域蛋白包被和多种Cry1类毒素交替包被筛选策略，获取了5个检测对象可覆盖多种Cry1类毒素的广谱抗体，比较分析突变抗体和母本抗体的亲和力及广谱性，探索广谱抗体识别区的分子结构特性，为建立高灵敏度多种BtCry毒素的免疫筛查方法和开发Cry毒素高效检测技术奠定基础。
目录
前言
第一章 绪论
一、Cry毒素的分类和命名
二、苏云金芽孢杆菌Cry毒素的结构与功能
三、苏云金芽孢杆菌制剂及其转基因产品存在的风险
四、苏云金芽孢杆菌Cry毒素检测技术
（一）生物测定法
（二）PCR扩增检测法
（三）分子杂交技术
（四）免疫学检测方法
五、抗体的发展
六、噬菌体抗体库技术
七、抗体基因的体外高频突变技术
第二章 人源化抗苏云金芽孢杆菌Cry1Ab毒素单域抗体的筛选及活性鉴定
一、材料与方法
（一）材料与试剂
（二）方法
二、结果与分析
（一）特异性重组噬菌体单域抗体的富集
（二）单克隆ELISA方法筛选阳性重组噬菌体
（三）菌液PCR结果
（四）噬菌体单域抗体的氨基酸序列比对
三、讨论
四、结论
……
第三章 同源建模结合点突变技术构建单域抗体定点饱和突变库
第四章 苏云金芽孢杆菌（Bt）Cry1类毒素共性结构域的分析定位
第五章 苏云金芽孢杆菌（Bt）Cry1类毒素共性结构域的原核表达、纯化及鉴定
第六章 Cry1类毒素的广谱抗体筛选、鉴定及广谱特异性分析
参考文献
附录
缩写符号说明
后记