《生物化学实验》PPT课件 北京师范大学 杨冬

 
课件内容： 
1 实验总论及主要生物化学仪器的使用 
1.1  绪论（实验理论） 
1.2 缓冲液的配置（实验操作） 
1.3 常用仪器的操作（实验操作） 
无菌操作及主要仪器设备的使用单元测验 
2 蛋白浓度及酶活性的测定 
2.1 利用G250测定蛋白质浓度（实验操作） 
2.2 利用连续法测定酶的活性（实验操作） 
2.3 蛋白质含量的测定（实验理论） 
2.4酶活性的测定（实验理论） 
2.5 利用终止法测定酶的活性（实验操作） 
酶活性的测定单元测验 
3 凝胶过滤层析分离标准蛋白 
3.1 凝胶过滤层析分离标准蛋白（实验理论） 
3.2 凝胶过滤层析分离标准蛋白（实验操作） 
凝胶过滤层析分离标准蛋白单元测验 
4.碱性磷酸酶AKP的原核表达 
4.1 外源基因的诱导表达（实验理论） 
4.2 AKP的原核表达（实验操作） 
基因表达测验 
5. AKP的分离纯化 
5.1 AKP的分离纯化（实验理论） 
5.2 细胞破碎（实验操作） 
5.3 离子交换层析（实验操作） 
5.4盐析（实验操作） 
5.5 分子筛层析分离AKP（实验操作） 
5.6AKP的浓缩（实验操作） 
AKP纯化测验 
6. AKP蛋白纯化方案的评估 
6.1 蛋白纯化方案的评估（实验理论） 
6.2 AKP分离纯化参数的测定（实验操作） 
蛋白纯化方案分析测验 
7. SDS-PAGE法分析AKP的纯化效果 
7.1 SDS-PAGE原理（实验理论） 
7.2SDS-PAGE电泳（实验操作） 
SDS-PAGE 测验 
8. AKP的动力学性质分析 
8.1AKP的动力学分析（实验理论） 
8.1 AKP的动力学分析（实验操作） 
酶促反应动力学测验 
9. AKP的特性分析 
9.1 抑制剂对酶促反应的作用（实验理论） 
9.2抑制剂对酶促反应的作用（实验操作） 
9.3激活剂，温度，pH对酶促反应的作用（实验理论） 
AKP活性影响因素测验 
10. 快速液相色谱分离纯化AKP 
10.1快速蛋白液相层析简介（实验原理） 
10.2应用快速蛋白液相层析纯化AKP（实验原理） 
10.3 应用快速蛋白液相层析纯化AKP（实验操作） 
FPLC测验 
11. AKP多克隆抗体的制备 
11.1多克隆抗体制备原理（实验理论） 
11.2腹水法多克隆抗体制备（实验操作） 
多克隆抗体制备测验 
12. ELISA和Western Blot分析制备的AKP多克隆抗体 
12.1 ELISA和Western Blot的原理（实验理论） 
12.2 ELISA技术-包被和封闭 （实验操作） 
12.3ELISA技术-显色检测（实验操作） 
12.4Western Blot技术： 转膜，杂交及显色检测 （实验操作） 
Western blot 和ELISA技术测试